生物扫描电镜主要利用二次电子成像拍摄材料的表面三维形貌情况，拍摄照片为黑白照片；一般用来观察细胞外表面的变形以及受损情况等，也可以观察材料在细胞表面的分布情况，广泛应用于检测生物样品、非均相有机材料、无机材料等微米、纳米范围内的表面特征。

                                             生物扫描

1.仅接收2.5%戊二醛固定后的样本；

2.样本需新鲜取材，并置于1.5ml离心管内，加入2.5%戊二醛固定液；

3.离心管口用封口膜封好（防止固定液漏液），离心管外用泡沫包好，可放1-2个冰袋，样品务必冰袋隔开，避免低温冰冻造成样品结冰；

4.测试周期为收到样品后的2周左右，具体实验周期及送样时间请与科学指南针工作人员沟通确认；

5.不建议回收样本，如必要可回收；

样品取材及固定常用方法：

1．2.5%戊二醛固定液如何配置？

市售25%戊二醛水溶液      10ml

0.2M磷酸盐缓冲液（pH7.0）   50ml

蒸馏水加至          100ml

2.0.2M，pH7.0磷酸缓冲液的配置方法？

A液：Na2HPO4·H2O 31.61g，或者Na2HPO4·7H2O 53.63g，或者Na2HPO4·12H2O 71.64g，加蒸馏水至1000ml

B液：NaH2PO4·H2O 27.6g，或者NaH2PO4·2H2O 31.21g，加蒸馏水至1000ml

0.2M，pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml（合起来是100ml）

3.为什么要加固定液？

固定液是为了保持细胞、组织的固有形态和结构。

4.制样流程？

新鲜取材后用2.5%戊二醛固定液固定样本，4℃过夜放置，倒掉2.5%戊二醛固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；用1%的锇酸溶液固定样品1-2h；小心取出锇酸废液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；用梯度浓度（包括30%，50%，70%，80%，90%和95%五种浓度）的乙醇溶液对样品进行脱水处理，每种浓度处理15min，再用100%的乙醇处理两次，每次20 min。用乙醇与醋酸异戊酯的混合液（V/V=1/1）处理样品30min，再用纯醋酸异戊酯处理样品1h或放置过夜。临界点干燥。镀膜，观察。处理好的样品在扫描电镜中观察。